为什么低温诱导染色体加倍要用卡诺氏液固定,而观察有丝分裂却不用?
固定是借助理化方法迅速将组织细胞杀死,尽量保持其形态结构及内含物的真实生活状态。因此,固定液必须迅速穿过细胞使蛋白质变性,且不影响染色体的完整性,从而达到良好的染色效果。卡诺氏固定液是3份无水乙醇和一份冰醋酸混合制备而成,其中无水乙醇的功能是使细胞缩小、脆化;冰醋酸的功能是不改变细胞的原来结构。所以卡诺氏液的功能是在不破坏细胞结构的情况下使细胞瞬间死亡,起到固定的作用。卡诺氏固定液最好现用现配,长时间放置影响固定的效果。固定时间为15~1440min,冰箱室温均可。其适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片等。
在徐作英、王重力主编的《中学生物实验教学论》第322页“观察洋葱根尖细胞有丝分裂”实验中,对“实验材料的准备”根尖取材与固定是这样描述的:待根尖长到1~2cm时(注意不宜过长),根据各种植物细胞有丝分裂的高峰时期,剪取根尖浸泡于固定液中2~4h,取出后保存于70%酒精中备用。
由此可见,观察根尖有丝分裂实验也可以用卡诺氏液固定,但不是必需的。因为在对根尖进行解离操作时,加入盐酸酒精混合液,其中盐酸起解离作用,而酒精能起固定作用。该实验用酒精固定已经起到了很好的作用,实验结果也比较理想,从简化实验程序考虑就不必再单独使用卡诺氏液固定。