PCR的过程中为何一定要引物？

实际上，体内复制DNA也是需要引物的，只不过必修二教材为了简化和降低难度，没有提而已。那么DNA复制为什么需要引物呢？

    在DNA进行复制的过程中，DNA聚合酶不能催化两个dNTP直接形成磷酸二酯键，只能催化dNTP磷酸端与一段核酸的羟基端形成磷酸二酯键，并且这段核酸必须与模板DNA互补结合，这段核酸叫做引物。引物可以是RNA也可以是DNA。

    从酶的功能特性上来说，DNA聚合酶需要快速的在DNA模板链上延伸，不能与模板链强结合，但若DNA聚合酶从头合成，则需要与模板链强结合，就不能快速延伸，这是没有办法同时解决的问题。所以DNA聚合酶不能从头合成但有着很强的延伸性和速度，而引发酶（合成引物的酶）可以从头合成但反应很慢而且延伸性较低，一般合成几个到十几个核苷酸就会从模版上解离。两种酶的同时存在解决了DNA复制过程中的矛盾。

    也有学者认为引物的必要性与DNA聚合酶的校对作用有关。DNA聚合酶的保真特性来源于其校正功能，一旦出错，错误位点与酶的催化聚合的结构亲和力下降，与催化外切的结构亲和力上升，会将错误位点切去，若没有引物，复制就不能重新开始。

在DNA进行复制的过程中，DNA聚合酶不能催化两个dNTP直接形成磷酸二酯键，只能催化dNTP磷酸端与一段核酸的羟基端形成磷酸二酯键，并且这段核酸必须与模板DNA互补结合，这段核酸叫做引物。引物可以是RNA也可以是DNA。从酶的功能特性上来说，DNA聚合酶需要快速的在DNA模板链上延伸，不能与模板链强结合，但若DNA聚合酶从头合成，则需要与模板链强结合，就不能快速延伸，这是没有办法同时解决的问题。

    所以DNA聚合酶不能从头合成但有着很强的延伸性和速度，而引发酶（合成引物的酶）可以从头合成但反应很慢而且延伸性较低，一般合成几个到十几个核苷酸就会从模版上解离。两种酶的同时存在解决了DNA复制过程中的矛盾。

    也有学者认为引物的必要性与DNA聚合酶的校对作用有关。DNA聚合酶的保真特性来源于其校正功能，一旦出错，错误位点与酶的催化聚合的结构亲和力下降，与催化外切的结构亲和力上升，会将错误位点切去，若没有引物，复制就不能重新开始。

    聚合酶链式反应:

    聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年，PCR已发展到第三代技术。1976年，中国科学家钱嘉韵，发现了稳定的Taq DNA聚合酶，为PCR技术发展也做出了基础性贡献。

    PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。